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血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。胎牛血清是血清中的一种,是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。; [# r M" R5 v
3 E, e/ X( M, b4 o胎牛血清的主要作用1 N/ h ?; v) z8 g9 ?4 Z# ^2 n
3 B. p% l8 c1 T. J P. m% H1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
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3 Y2 J8 q9 N. i: V5 C2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。5 q& |' N3 X# p
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3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
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0 O4 D5 K+ z. C) V2 X1 g4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。7 V6 U" U0 a% J# n
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5.起酸碱度缓冲液作用。 [" ^" c1 Q6 K* W3 Y9 N) {, ^
" e* b$ B4 O2 [$ W5 q L! r# b6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
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胎牛血清的选择- r; O2 g: @/ b) ~
6 |, h2 `" g6 Q) U: s! M1.颜色
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, j/ u! Y6 G1 n, L; o3 o根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高度对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程中严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
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# D/ K F( v) a进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。% V; T) t, T9 ~/ {9 U
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总的来说,国产的血清总呈现出蜡黄,进口的血清质量最好的呈现出淡黄、微红色。当然热灭活血清或保存不当的血清,由于红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。, b( w% I1 y& c2 R. Q9 w3 |2 h
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2.沉淀4 ]% x0 S; B0 |/ _" ?9 q
5 d6 D* \' h8 b& K6 X3 W& E9 c8 I很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
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8 X& Z3 u9 Q, M, E' Z血清中的沉淀是由纤维蛋白凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。6 d6 O4 {6 T7 I* f' `- ]
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国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产经过多次冻融,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。4 L- f/ T T5 ?, a! E
- f" w4 Y2 P* Y进口的胎牛血清过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛年龄在2周左右,血清中的各种大量纤维蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
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9 `& q [1 c% C当然,购买回来的血清都是冷冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢融化,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
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! e8 a6 Y: B* C, f8 h# S2 d, ?3.澄清度
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进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,标签为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。. E( B8 c6 _; k6 ?% y
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